截止 2022 年 5 月 7 日至6月21日，全球已有38個(gè)國(guó)家報(bào)道確認(rèn)感染猴痘病例，總計(jì)病例數(shù)達(dá)到2677例（數(shù)據(jù)源自Global.Health）。

本月16日，WHO免疫戰(zhàn)略咨詢專家組（SAGE）制定了有關(guān)天花和猴痘疫苗臨時(shí)指南。鑒于猴痘疫情在全球非常規(guī)流行地區(qū)快速傳播，專家們指出應(yīng)對(duì)猴痘的流行病學(xué)、臨床后果以及各種傳播方式的作用展開(kāi)更深入的研究。

Fig1.自2022年5月7日以來(lái)每個(gè)國(guó)家/地區(qū)的確診病例數(shù)

上篇推文我們已經(jīng)講到過(guò)猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)的來(lái)源，傳播途徑以及結(jié)構(gòu)（見(jiàn)端午驅(qū)五毒|關(guān)于猴痘病毒，看完這篇就夠了），其實(shí)痘病毒存在兩種形式：成熟病毒粒子(mature virion，MV)和脂質(zhì)膜(extracellular enveloped，EV)，EV有一層來(lái)自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的包膜，此包膜在與細(xì)胞接觸后分解，露出外膜進(jìn)而直接和細(xì)胞膜發(fā)生融合，隨后進(jìn)行下游的感染。而MV可以直接和細(xì)胞膜進(jìn)行融合，至少有12種MV參與融合，同時(shí)可以通過(guò)巨胞飲內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞，外膜與內(nèi)吞體膜在內(nèi)吞體里融合釋放出內(nèi)膜包繞的病毒核心。復(fù)制的場(chǎng)所是帶孔洞的內(nèi)膜中進(jìn)行，之后孔洞閉合，病毒粒子進(jìn)行下一步的成熟形成典型的痘病毒啞鈴形態(tài)，標(biāo)志MV正式形成。最終完成的病毒粒子可以有兩種方式離開(kāi)細(xì)胞：最主要的一種為細(xì)胞裂解，MV直接釋放。另一種是利用細(xì)胞的分泌轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，通過(guò)高爾基體分泌至細(xì)胞外，這種方式會(huì)使得病毒額外獲得一層被膜產(chǎn)生EV。

Fig2.痘病毒復(fù)制周期

普健生物聯(lián)合法國(guó)Proteogenix頂級(jí)科學(xué)團(tuán)隊(duì)，雙方通過(guò)對(duì)猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)和痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)的基因序列進(jìn)行深入研究成功設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)真核系統(tǒng)表達(dá)的猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)系列核心蛋白A29L、A35R、B6R、M1R、E8L以及相關(guān)具有生物學(xué)活性的中和抗體產(chǎn)品，助力疫苗、藥物、診斷試劑等不同方向的研究。

真核表達(dá)猴痘核心蛋白及相關(guān)中和抗體

A29L

A29L是細(xì)胞內(nèi)成熟病毒（IMV）表面包膜蛋白（與牛痘病毒VACV,A27同源）。溶瘤痘苗病毒(VV)屬于痘病毒科中一擁有192kb雙螺旋DNA遺傳物質(zhì)的病毒,會(huì)在細(xì)胞質(zhì)中繁殖出具有鞘膜的病毒,進(jìn)而感染其他不同種的哺乳動(dòng)物細(xì)胞及個(gè)體.VV中的A27L基因能表達(dá)出一14kDa大小的鞘膜蛋白,此蛋白能與細(xì)胞表面上的硫酸乙酰肝素（Heparan Sulfate）作用使病毒跟細(xì)胞結(jié)合并且可催化細(xì)胞融合。

A35R

A35R是細(xì)胞內(nèi)包膜病毒粒子（IEV）和細(xì)胞外包膜病毒粒子（EEV）的包膜成分，與脊索痘病毒A33R同源。痘苗病毒中的A33R在病毒粒子在細(xì)胞間的傳播中起著至關(guān)重要的作用，是疫苗開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)，也有研究表明A35R是猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)血清學(xué)檢測(cè)的潛在靶點(diǎn)。

B6R

B6R是宿主范圍蛋白，位于細(xì)胞外包膜病毒粒子（EEV）的膜上，與牛痘病毒補(bǔ)體控制蛋白B5同源，參與補(bǔ)體激活的負(fù)調(diào)節(jié)。研究表明B5依賴于與A33或A34的相互作用，以定位到細(xì)胞內(nèi)包膜的位點(diǎn)，并能相互結(jié)合釋放到細(xì)胞外病毒體的包膜中。B5對(duì)于有效生產(chǎn)感染性EV至關(guān)重要，A33，A34，B5三者復(fù)合物在ER退出以及三種糖蛋白正確定位到包裹的細(xì)胞內(nèi)部位中起作用。

M1R

M1R與牛痘病毒L1蛋白同源，是一種在成熟IMV顆粒表面發(fā)現(xiàn)的跨膜蛋白。由L1R ORF編碼，高度保守，參與病毒粒子組裝，在病毒進(jìn)入和成熟過(guò)程中發(fā)揮重要作用。L1是誘導(dǎo)低pH觸發(fā)的細(xì)胞-細(xì)胞融合所必需的，且對(duì)牛痘病毒復(fù)制至關(guān)重要。

E8L

E8L是病毒入侵宿主細(xì)胞重要基因，在病毒入侵宿主完成復(fù)制的過(guò)程中作為MV的細(xì)胞表面結(jié)合蛋白與細(xì)胞表面的硫酸軟骨素結(jié)合，以提供病毒粒子附著在靶細(xì)胞上。有研究表明利用siRNA技術(shù)能有效拮抗Monkeypox virus的A6R和E8L基因，由此構(gòu)建siA6-a和si8 -d能破壞MPV復(fù)制。

H3L

H3L是一種324個(gè)AA長(zhǎng)的糖基轉(zhuǎn)移酶，位于病毒包膜上，在與宿主細(xì)胞的附著和隨后的痘病毒進(jìn)入中起關(guān)鍵作用。研究表明，天花疫苗誘導(dǎo)的抗體與H3蛋白結(jié)合，分化簇 (CD8)+ T細(xì)胞將H3L識(shí)別為抗原，表明其免疫學(xué)意義。

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